PCR, au mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi, ni mbinu inayotumiwa kukuza mfuatano wa DNA.Ilianzishwa kwa mara ya kwanza katika miaka ya 1980 na Kary Mullis, ambaye alitunukiwa Tuzo ya Nobel ya Kemia mwaka wa 1993 kwa kazi yake.PCR imebadilisha biolojia ya molekuli, kuwezesha watafiti kukuza DNA kutoka kwa sampuli ndogo na kuisoma kwa undani.
PCR ni mchakato wa hatua tatu unaofanyika katika mzunguko wa joto, mashine ambayo inaweza kubadilisha kwa kasi joto la mchanganyiko wa majibu.Hatua tatu ni denaturation, annealing, na ugani.
Katika hatua ya kwanza, denaturation, DNA iliyopigwa mara mbili inapokanzwa kwa joto la juu (kawaida karibu 95 ° C) ili kuvunja vifungo vya hidrojeni vinavyoshikilia nyuzi mbili pamoja.Hii inasababisha molekuli mbili za DNA za mstari mmoja.
Katika hatua ya pili, kuchuja, halijoto hupunguzwa hadi karibu 55°C ili kuruhusu vianzio kuungana na mfuatano wa ziada kwenye DNA yenye ncha moja.Primers ni vipande vifupi vya DNA ambavyo vimeundwa ili kuendana na mfuatano wa riba kwenye DNA inayolengwa.
Katika hatua ya tatu, upanuzi, halijoto huinuliwa hadi karibu 72°C ili kuruhusu polimerasi ya Taq (aina ya polimerasi ya DNA) kuunganisha uzi mpya wa DNA kutoka kwa vianzio.Taq polymerase inatokana na bakteria wanaoishi kwenye chemchemi za maji moto na wanaweza kustahimili halijoto ya juu inayotumika katika PCR.
Baada ya mzunguko mmoja wa PCR, matokeo ni nakala mbili za mlolongo wa DNA lengwa.Kwa kurudia hatua tatu kwa idadi ya mizunguko (kawaida 30-40), idadi ya nakala za mlolongo wa DNA lengwa inaweza kuongezeka kwa kasi.Hii ina maana kwamba hata kiasi kidogo cha kuanzia DNA kinaweza kukuzwa na kutoa mamilioni au hata mabilioni ya nakala.
PCR ina matumizi mengi katika utafiti na uchunguzi.Inatumika katika chembe za urithi kuchunguza kazi ya jeni na mabadiliko, katika uchunguzi wa kuchunguza ushahidi wa DNA, katika utambuzi wa magonjwa ya kuambukiza ili kugundua uwepo wa viini vya magonjwa, na katika uchunguzi wa kabla ya kuzaa ili kuchunguza matatizo ya kijeni katika vijusi.
PCR pia imerekebishwa kwa matumizi katika anuwai kadhaa, kama vile kiasi cha PCR (qPCR), ambacho huruhusu kiasi cha DNA kupimwa na kubadili unukuzi PCR (RT-PCR), ambayo inaweza kutumika kukuza mfuatano wa RNA.
Licha ya matumizi mengi, PCR haina mapungufu.Inahitaji ujuzi wa mlolongo lengwa na muundo wa vianzio vinavyofaa, na inaweza kukabiliwa na makosa ikiwa hali za majibu hazitaboreshwa ipasavyo.Hata hivyo, kwa usanifu na utekelezaji makini wa majaribio, PCR inasalia kuwa mojawapo ya zana zenye nguvu zaidi katika biolojia ya molekuli.
Muda wa kutuma: Feb-22-2023